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反相高效液相色谱法是指
反相高效液相色谱法是指
A、极性的固定相和非极性流动相
B、十八烷基硅烷键合硅胶与甲醇,乙腈加水等流动相
C、十八烷基硅烷键合硅胶与加离子对的甲醇、乙腈、水流动相
D、流动相极性大于固定相极性的
E、非极性的固定相与极性的流动相
B,C,D,E反相高效液相色谱法是指流动相极性大于固定相极性的分配色谱法称为反相分配色谱法,最常用的非极性固定相是十八烷基硅烷键合硅胶或者是辛基键合硅胶,流动相常用甲醇一水或乙腈一水。
反相高效液相色谱的主要优点?
1.几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。 反相色谱法适于分离非极性,极性或离子型化合物,大部分的分析任务皆由反相色谱法完成;
2.具有柱效高,使用寿命长,重现性好,几乎对各种类型的有机化合物都具有良好的选择性,用可用于梯度洗脱操作
3.反相色谱应用广泛,技术方面也比较成熟,可以与大多数检测器相匹配
下面分享相关内容的知识扩展:
反相高效液相是极性大的主分先出峰吧,人参皂苷Rg1与Rb1,化学性质是Rb1极性大,问什么反而是极性小的Rg1
1,反相色谱化学键和硅胶的粒度很小,导致影响出峰时间不完全是样品极性的因素。其中还包括在洗脱过程中的作用力的综合影响。
2 ,人参皂苷的极性相差也不是很大,不同的展开剂点板的分离距离不同,在反相色谱中很可能由于相互作用力和极性的综合作用导致这样的结果。
3,不同的流动相,他们的出峰顺序也可能不同。
反相高效液相色谱法中,脂溶性组分在色谱柱中的移动速度比亲水性组分( ) A.快 B.慢 C.相同 D.不一定
A.快
B.慢
C.相同
【答案】:B脂溶性组分在固定相中易于溶解,分配系数K大,tR大。
蛋白为什么要用反相高效液相,不能用普通液相吗
液相只有两种,一种是反相,一种是正相。非反即正,没有你所说的那种“普通液相”。
一般来说反相色谱会使用反相的流动相和反相的色谱柱。反相流动相的特点是里面有水,水的极性很大,相似相容,所以一般反相色谱用来洗脱极性比较大的物质。
如果待测物质的极性非常小,那么用反相色谱洗脱不出来,那就必须用正相。正相色谱的流动相是极性小的非极性或弱极性有机溶剂,一般洗脱极性小的物质。
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